ВИВЧЕННЯ ПАРАМЕТРІВ НЕРВОВОЇ ТКАНИНИ IN VITRO

Abstract

У роботі було описано процес культивування нейронних клітин та перепрограмування астрогліальних клітин у головному мозку миші за допомогою ретровірусної трансдукції. Культивування нейронних клітин в спеціальному середовищі, включаючи колагенові матриці, дозволяє вивчати їх ріст, функції та взаємодію між клітинами. Зібрані астрогліальні клітини були культивовані в спеціальному середовищі, а потім використовувалися ретровірусні вектори, що містять гени Ngn2 і Mash1, для експресії цих генів у клітинах. Диференціація астрогліальних клітин у нейрони була оцінена за допомогою імунного фарбування на наявність раннього нейронального маркера TuJ1. Результати показали, що перепрограмовані нейрони проявляли характеристики зрілих нейронів, але їх функціональна зрілість була обмежена. Крім того, досліджувалась проліферація клітинних ліній PC12, N1E-115 та SH-SY5Y, використовуючи барвник BrdU для вимірювання реплікації клітин. Було показано, що деякі хімічні речовини, зокрема афідиколін, мали значний вплив на проліферацію клітин у різних лініях. Ці результати свідчать про значення досліджень перепрограмування клітин та нейротоксичності для розуміння розвитку та функціонування нервової системи та оцінки потенційної шкідливої дії хімічних речовин. Abstract: The work described the process of cultivating neuronal cells and reprogramming astroglial cells in the mouse brain using retroviral transduction. Cultivation of neural cells in a special environment, including collagen matrices, allows studying their growth, functions and interaction between cells. The harvested astroglial cells were cultured in a special medium, and then retroviral vectors containing the Ngn2 and Mash1 genes were used to express these genes in the cells. Differentiation of astroglial cells into neurons was assessed by immunostaining for the early neuronal marker TuJ1. The results showed that the reprogrammed neurons exhibited characteristics of mature neurons, but their functional maturity was limited. In addition, proliferation of PC12, N1E-115 and SH-SY5Y cell lines was investigated using BrdU dye to measure cell replication. Some chemicals, particularly aphidicolin, have been shown to have significant effects on cell proliferation in various cell lines. These results highlight the importance of studies of cell reprogramming and neurotoxicity in understanding the development and functioning of the nervous system and assessing the potential harmful effects of chemicals.